試劑組成
操作程序
1.加樣反應(yīng)：取出所需量的反應(yīng)板條，每孔加樣本稀釋液（5號(hào)液）2滴，再分別加入待檢的血清樣本10ul，混勻。同時(shí)設(shè)陰性、陽性及空白對(duì)照各1孔，陰性、陽性對(duì)照與待檢樣本同步處理，空白對(duì)照孔僅加入樣本稀釋液（5號(hào)液）2滴。37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體，每孔加洗滌液(2號(hào)液)1滴，立即用蒸餾水注滿，靜置30秒后甩去，再直接用蒸餾水洗滌四次，甩去，拍干。
2.加酶反應(yīng)：除空白對(duì)照孔外其余每孔加酶結(jié)合物(1號(hào)液)2滴，37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體，如上洗滌，拍干。
3.顯色反應(yīng)：加底物(3號(hào)液)和顯色劑(4號(hào)液)各1滴，混勻，37℃下避光顯色10分鐘。加終止液(6號(hào)液)1滴，混勻，終止反應(yīng)（加終止液后藍(lán)色會(huì)變?yōu)辄S色）并觀察結(jié)果。
結(jié)果判斷
1．肉眼觀察：陰性對(duì)照接近無色，陽性對(duì)照呈明顯黃色，表示試驗(yàn)有效。待檢孔接近無色表示該標(biāo)本為陰性，待檢孔呈明顯黃色表示該標(biāo)本為陽性。
2．儀器判斷：以空白對(duì)照調(diào)零用酶標(biāo)儀于450nm（620nm作參比波長(zhǎng)）讀取O.D值，待檢孔O.D值大于陰性對(duì)照2.1倍者為陽性。當(dāng)陰性對(duì)照O.D值低于0.08時(shí)按0.08計(jì)算。
注意事項(xiàng)
1.試劑盒在2-8℃下保存，每次取出時(shí)先平衡至室溫后使用。滴瓶每次用后一定要將蓋擰緊，各瓶蓋之間切不可混用。各試劑盒之間不可混用。
2.洗滌時(shí)將蒸餾水加滿孔內(nèi)，每次停放三十秒鐘，甩去孔內(nèi)液體。禁用自來水等其它水源。
3.為提高試驗(yàn)的可比性，建議使用儀器判讀結(jié)果。
4.如有條件，*好使用水浴箱孵育。
